Hamilton 離子排斥色譜柱在使用過程中則需要注意包裝與標簽檢查、閱讀說明書、系統(tǒng)沖洗控制、避免高壓操作、記錄使用情況、注意流動相選擇、控制實驗條件、防止污染以及定期維護等事項。
1.包裝與標簽檢查:在使用前要仔細檢查色譜柱的包裝和標簽,確保沒有物理損傷且規(guī)格和填料類型符合實驗需求。
2.閱讀說明書:仔細閱讀使用說明書,了解色譜柱的pH穩(wěn)定性范圍、最大操作壓力等參數(shù)。
3.系統(tǒng)沖洗控制:在系統(tǒng)沖洗時要注意控制流速和沖洗時間,以確保色譜柱的性能穩(wěn)定。
4.避免高壓操作:在更換色譜柱或其他涉及高壓的操作前,應(yīng)關(guān)閉儀器電源并停止淋洗液輸送,避免系統(tǒng)在高壓或流動狀態(tài)下操作。
5.記錄使用情況:記錄舊柱的使用時長、分析樣品類型及累計進樣次數(shù)等信息,為后續(xù)方法優(yōu)化提供參考。
6.注意流動相選擇:選擇合適的流動相對于保證分離效果至關(guān)重要。應(yīng)根據(jù)目標離子的性質(zhì)和分析要求來選擇合適的流動相組成和濃度。
7.控制實驗條件:嚴格控制實驗條件如溫度、流速等,以確保實驗結(jié)果的可重復(fù)性和準確性。
8.防止污染:在使用過程中應(yīng)注意防止樣品中的雜質(zhì)或污染物進入色譜柱,以免影響其性能和壽命。必要時應(yīng)對樣品進行預(yù)處理以去除干擾物質(zhì)。
9.定期維護:定期對色譜柱進行清洗和維護,以延長其使用壽命并保持良好的分離效果。
Hamilton 離子排斥色譜柱的工作原理:
1.Donnan排斥效應(yīng):離子排斥色譜基于Donnan膜平衡原理,固定相通常采用高容量磺化陽離子交換樹脂,其表面帶有固定電荷。當樣品溶液流入時,強電離組分會因同種電荷相斥而快速通過色譜柱,幾乎無保留;而非離子性或弱電離物質(zhì)則因不受此斥力影響,能夠進入樹脂內(nèi)部進行分配。
2.多重作用機制協(xié)同分離:除了Donnan排斥外,還包括吸附和空間排阻作用。弱電離物質(zhì)通過范德華力、疏水作用等非離子性相互作用實現(xiàn)保留,這種差異使得不同性質(zhì)的化合物得以有效分離。
3.流動相的選擇:通常使用稀鹽酸或含有機酸的溶液作為流動相,進一步促進離子化的物質(zhì)快速洗脫,同時維持非離子成分的保留行為。檢測體系常配備電導(dǎo)檢測器和紫外可見光度檢測器,以適應(yīng)不同性質(zhì)待測物的鑒定需求。